IMG 1211261722
LMit innktvcfflni
L. Oni ml unie preparatów trwałych pozwala lacvch łioli»nvBw< omanrllr komórkowe otoc/onc polcdyncza Mona lub lukalfcaclc spccyfle/nych illn nich CBŁYIIIÓW.
n) pyl węglowy w innkrofagnch płucnych
b) npnrat Oolglego w komórkach zwojów przy kręgowych
c) kwaśna fosfataza w komórkach kanalików nerkowych
d) fosfataza zasadowa w rąbku szczoteczkowym kanalików nerki
2. Obserwacja Iłrosomów w komórkach ze skórki laski spichrzowej cebuli barwionych oranżeni akrvdvnv.
a) Fragmenty cpidermy łuski spichrzowej cebuli (z wewnętrznej strony) i przekroje poprzeczne młodych korzeni cebuli przepłukać w wodzie.
b) Materiał umieścić umieścić na szkiełku podstawowym w kropli oranźu akrydyny i obserwować w mikroskopie fluorescencyjnym.
Oranż akrydyny fluoryzuje tylko w kwaśnym środowisku. Barwa fluorcscencji zależy od pH środowiska. W lizosomach fluoryzuje on na kolor pomarańczowy, a w jądrze komórkowym na jasno zielony.
W cytoplazmie komórki nie obserwuje się fluorescencji.
3. Wykrywanie aktywności Dcroksvdazv — enzymu dnniktcrVttYcam»dł> peroksysomów i ziarnistości granulocytów.
Pcroksydazy podobnie jak katalazy, sążdazoporfliynami katalizującymi reakcje utleniania:
Peroksydaza + Hj 02 + substrat Hi -> peroksydaza - utleniony substrat - H; O
Przy cytochemicznej metodzie oznaczania tego enzymu używa się, w charakterze substratu, 3,3 - dwuaminoben2ydyny (DAB). Pod wpływem utleniania ulega ona polimeryzacji pozostając ściśle związana z utleniającym hemoproteidem. Brunatne zabarwienie polimerów pozwala lokalizować aktywność peroksydaz na poziomie mikroskopu świetlnego.
Odczynniki:
Odczynnik peroksydazowy;
• Do 30 ml 40 % etanolu dodać kilka kryształków benzydyny i mieszać przez kilka minut (powstanie roztwór nasycony).
• Przesączyć przez gazę, a do przesączu, na każde 10 ml dodać 0.02 ml H:Oj. Roztwór jest nietrwały.
WyKonwjnuMkfiii' _. . .
*) rngm«nty cpidermy łuski spichrzowej cebuli (z wewnętrznej strony) i przekroje poprzeczne młodych korzeni cebuli przepłukać w wodzie,
b) Materiał umictoi w 10 ml odczynnika perofcsydazowego na 10 minut, w temperaturze pokojowa)
c) Spłukać wodą
,i) Umiejcie na szkiełku podstawowym w kropli glicerolu i obserwować w mikroskopie iwictlnym
4. riuorescencYlm metoda badania oksydoredukcyinych właściwości żywych Komórek z zastosowaniem błękitu Nilu I siarczanu błękitu Nilu.
Mleku Nilu me jest fluorochromem. ale fluoreacencję daje jego forma zredukowana. Proatym sposobem redukowania błękitu Nilu jest dodanie do jego roztworu siarczanu sodu V>.) Produkiem reakcji jest siarczan blekitn Silu dający fluorescencję żółtą.
'a /ywych. metabolicznie aktywnych komórkach zachodzą procesy oksydoredukcyjne, w ibcc zcc<> błękit Silu podany do komórki może alce redukcji. Zaadsorbowany w formie zredukowanej na tłuszczach obojętnych daje fluorescencję zioóstozołta.
Odczynniki:
Błękit Nilu - wodny roztwór w rozcieńczeniu 1:40 000 o pH 7-8 Wykonanie reakcji:
• Wykonać 2 preparaty ze skórki wewnętrznej strony łuski spichrzowej cebuli (lub Hmmandms):
a) w kropli wody w celu zbadania autofluorescencji materiału
b) w kropli błękitu Nilu
uwaga: w preparacie błękit Nilu musi ulec redukcji w żywych, aktywnych metabolicznie komórkach. Reakcja ta jest aktywowana przez światło niebieskie w zakresie 470 - 490 nm. Czas oczekiwania na pojawienie się fluorescencji wynosi zależnie od rodzaju obiektu 1 -60 minut.
• Przeprowadź obserwacje w mikroskopie fluorescencyjnym zwracając uwagę na fluorescencję ciał olejowych (sferosomów).
• Określić czas pojawienia się fluorescencji we wszystkich preparatach, opisać wyniki i wyciągnąć wnioski.
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
IMG 1211260311 0 iifK 7ism ■w > stop? metal’ lyt nf portnoi :■ Ml obrabiarka WaafeiKto skmma^at
IMG 1211260311 0 iifK 7ism ■w > stop? metal’ lyt nf portnoi :■ Ml obrabiarka WaafeiKto skmma^at
IMG?01 LUtOt MtAHDtUO tnyii ml nie prosiło* it la magiera dawała mi robole u upatrcyła tobie moją c
IMG 39 (2) ^^ssssg^s*-: iŁslJ^-"^auł •%. Mł »VaNll
IMG$77 7$ .t$VA K MV .W^ KM* Ml.
IMG54 (18) Bielactwo nabyte (lfitiligol Leczenie Preparaty ochronne przed światłem fotochemoterapia
IMG(63 Inseminacja nasieniem świeżym A f . . ^ — • Ml USB OT TfBSn SBITIBn •
IMG?33 Egz. nr 1 B - ... oni mają taką większość w parlamencie, że y grozi im wyłącznie y LiDf.y, pr
IMG?84 (2) r Eg/- nr 1 C - I oni się w związku z tym......... B •.........Stambuł......... C
IMG?52 (2) EflŁnr 1 i, że oni są właścicielami tego tam... procentowo ilości paliwa, które Jest w te
IMG#16 Itnl^y, «■**««>* *rtovv doli ml / ul w roaworze wzorcowy o iTml I paoo»™
IMG#46 6 Fundament o długości 3 .Oni i szerokości 2.Om jest posadowiony na głębokości 2.0 m poniżej
IMG 1211260348 0 gdzie n W d 1000v . n z ,
IMG 1211260405 0 m flt —~y^Prteixiom pmerzctna prutoima At Pomwm. wMm- jmłsżmji Ag Rys 6. Powierzch
IMG 1211260424 0 .r.»niu.jwi mc ostrzone w Ufpc^i^crwapimttaKji mocowane mechanicznie w oprawce noż
IMG 14 6. Podstawy technologii wybranych bioproduktów6.4.2.Otrzymywanie preparatów lipaz Lipazy (hyd
więcej podobnych podstron