07

Rys. 10.14. Typowe obrazy chromatograficzne rozdziału nuklcozydów zawartych w hydrolizatach DNA, przygotowanych wg procedury opisanej w ćwiczeniu. 20 pi hydrolizatu chromatografowano na kolumnie Ultra-sphcrc C_1H. stosując clucję izokratyczną za pomocą 50 mM roztworu KH₂P0₄ zawierającego 5% (v/v) metanolu, z szybkością przepływu eluentu 1 ml,-min. i używając detekcji UV przy długości lali 279 nm. Preparaty DNA przygotowywane w sposób opisany w ćwiczeniu zawierają czasem dużą ilość RNA. W związku z tym na chroraatogramach obserwuje się również piki pochodzące od rybonukleozydów wchodzących w skład RNA. a)Chronuitogram prezentuje rozdział nuklcozydów hydrolizatu DNA zawierającego bardzo małą ilość RNA. Główne szczyty chromatogramu w tym przypadku pochodzą od dcoksynuklcozydów: 2'-dcoksycytydyny (dC), 2-deoksyguanozyny (dG), 2'-deoksytymidyny (dT) i 2-dcoksyadenozyny (dA). Kiedy preparat wyizolowanego DNA zawiera duże ilości RNA, typowy chromatogram przybiera kształt b). Poza już wymienionymi deoksy-nukleozydami pochodzącymi z DNA obserwuje się w tym przypadku również cztery duże szczyty rybonuk-Icozydów wchodzących w skład RNA: cytydyny (C), urydyny (U), guanozyny (G) i adenozyny (A); ponieważ wszystkie te szczyty są rozdzielone, szczyty rybonukleozydów nic przeszkadzają w oznaczeniu dC i 5-Mc-dC

427

Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
07 Ćwiczenie 10.14. Jednoczesne izolowanie DNA i RNA z materiału biopsyjnego, kultur komórkowych, r
Kolendowicz5 Rys. 10-13 m Rys. 10-14 Rys. 10-15 Przykład 10-7. Obliczyć liczbę nitów o średnicy d =
04 Rys. 10.2. Widma absorpcyjne w UV molowych roztworów zasad purynowych i pirymidynowych w 0,
08 Rys. 10.3. Widmu fluorescencyjne: 1 oranżu akrydynowego oraz kompleksów: 2 oranż ak-rydynowy-DNA
09 Rys. 10.7. Schemat oscylogramu dE/dt = /(£) natywnego i zdenaturowanego DNA w środowisku mrówcza
03 Rys. 10.11. Przykład pomiaru głębokości wgięcia anodowego krzywej dE/dt =f(E). Oscylopolarogram
0 5 Rys. 10.16. Schemat analizy opartej na technice biotu i hybrydyzacji metodą Southerna przyczyną
I 50 -lecie Polskiej Radiolokacji I 50 -lecie Polskiej Radiolokacji Rys. 10.14. Wóz WD2001 z zespołe
Rys. 10.14. Przebiegi czasowe sygnałów wejściowych i wyjściowych przerzutnika JK master-slcwe Rys. 1
Strona0258 258 kością, lecz wzrastała, to za pomocą rys. 10.14 nietrudno wyobrazić sobie, że w tym p
img387 254 254 Rys. 10.14. Wkraplacz laboratoryjny ściej zimna woda). Zasadniczo w laboratorium są s
004 (4) Układy regulacji i sterowania kl.4T 4 Rys. 10.5. Przykłady podstawowych odmian zaworów rozdz

więcej podobnych podstron