20101020038
Laboratorium 3 BIAŁKA SUROWICY KRWI
Ćwiczenie 1. Rozdział alektroforetyczny białek surowicy (rry/i p« atiarpz.e Istotę elektroforezy stanowi wędrówka w polu elektrycznym cząstaczek mających dodatni lub ujemny ładunek elektryczny Proces rozdzielania łych cząsteczek polega na różnicy szybkość ich wędrowania w roztworze lub w nośnikach (bibuła, Żela) Elektroforeza żelowa wykorzystuje porowate substancje żelowe (jnk agaroza żal połiakrylamldowy). '.o pozwala na jzysfcur. lepszego rozdziału mieszaniny związków, gdyż oka sieci talu stanowią sito molekularne dodatkowo rozdzielające cząsteczki
Cząsteczki białka mają właściwości amfołeryczne - w zależności od pH występu,» postaci amonowej lub kationowe! Podczas elektroforezy białek surowicy krwi na agarore 'zrywany jest bufor o pH 8.8 W takim pH białka surowicy krwi mają charakter elektroujemny ■ w polu elektrycznym przemieszczają arę w kierunku anody (♦) Rozdział elektroforetyczny (We^* eurosrcy na żelu agarozowym pozwala na uzyskanie 0 trakcji b:;i'ek surowicy krwi s1tx.rr.r7 ol-gioc -d2-globuliny, (31-globulmy. 02-globulmy oraz y-globuliny
W celu przeprowadzana rozdziału eiektroforetycznego bWe* s. • jv. .7 krwi -y.•
odpowiednio rozcieńczonej surowicy (po 5 uU ne płytkę żelu <. ■ . Nastw-e oauszoną
płytkę umieszcza się w komorze ełetoeśorerycznei tak. by mnjeca meozeme :.-:vrc oiajdcwar. się od strony katody (-). Elektroforezę przeprowadza sę w zj.- ■ komorze przez 20 mai przy napięciu 100 V Po rozdziała białka są utrwalane na MU za pomocą raehsonHmeezamny kwaefMnhnł a następnie barwiono przy uzyou roowuw czarni a- : -.s| Nadm 3- barwnaca usuwany jest za pomocą kwaśnego roztworu Po odbanwenu oraz wysuszemu ze jast golow. do odczytu deneytornetrycznago
Po otrzymaniu odczytu z densytometru oceń uzyskana kamąe fretek surow.cy krwi u badanego paqenta 1 sformułuj wnioski dotycząca stanu zdrowia pacjenta
Ćwiczenie 2r Oznaczanie łażenia błafca w naowtcy krwi metoda bsiretowa a) Przyootewame toZYwei wzomaat
Z roztworu standardowego albuminy (10mg/mL w 0,9% roztworze NaCI) przygotuj (używając 0 9% NaCI jako rozpuszczalnika) roztwory o objętości końcowej v ■ 0,5 mL. zawierające bi3«o o stężeniach 2. 4, 6. 0, 10 mg/mL Do każdej probówki zawierającej białko o odpowiednim stężemu dodaj po 2 mL 0.6% roztworu NaCI. a po wymieszaniu po 2.5 mL odczynnika biuretowego Zawartość probówek dokładnie wymieszaj Przygotuj próbę żarową (ślepą) uwierającą 2 5 mL 0.9% NaCI 12.5 mL odczynnika biuretowego
Po 20 minutach zmierz absorbancję prób badanych wobec próby ślepej na spektrofotometrze przy długości fali A = 525 nm
Korzystając z uzyskanych wyników przygotuj na papierze milimetrowym wykres zależności absorbancji (oś Y) od stężenia białka (oś X) oraz oblicz współczynnik kalibracji K (CfA)
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
Laboratorium 3 BIAŁKA SUROWICY KRWI Ćwiczenie 1: Rozdział elektroforetyczny białek surowicy Krwi na
Image019 Zagadnienia do przemyślenia • Na jakie rozdzielają się białka surowiej k
Zdjęcie0220 (8) 34. Na ponitstyra diagramie przedstawiono rozdział clektroforetyczny białek surowicy
Zdjęcie0220 (9) 34. Na poniższym diagramie przedstawiono rozdział clektroforetyczny białek surowicy
biofizyka cwiczenie 7 str 1 ĆWICZENIE 7 WYZNACZANIE STĘŻENIA BIAŁKA W SUROWICY KRWI METODĄ OPADANIA
CCF20121026 000 Ćwiczenie 5 Temat: Ilościowe oznaczenie białka w surowicy krwi zwierząt metodą Lowry
img111 3 Ćwiczenie 4.33. l/olowiinie białek surowicy wiążących jony motali (J. Porath i wsp 1975: Na
17.03-21.03 Ćwiczenie laboratoryjne I (Białka I) - część praktyczna (4 godz.) w salach laboratoryjny
1. Cel ćwiczenia Rozdział białek na kolumnie wypełnionej żelem Sephadex
Rozdział 10Instrukcja ćwiczenia laboratoryjnego„Cechowanie sondy Prandtla ” 7. Cel ćwiczenia Celem
17.03-21.03 Ćwiczenie laboratoryjne I (Białka I) - część praktyczna (4 godz.) w salach laboratoryjny
img111 3 Ćwiczenie 4.33. Izolowanie białek surowicy wlt
CCF20130221 003 Białka surowicy krwi Frakcja Stężenie wyrażone w % całkowitego stężenia
P1060492 5. Które z wymienionych białek są białkami osocza krwi i f V albuminy _ n
CCF20121026 001 2. Ilościowe oznaczanie białka w surowicy krwi metodą biuretową Zasada oznaczenia po
więcej podobnych podstron