img246 2
bakterii, /dolnych do reakcji z TTC, rosną w postaci czerwonych kolonii
na płytkach lub wytwarzają czerwony strąt w hodowlach płynnych.
15.4.6. Redukcja błękitu metylenowego
Redukcja błękitu metylenowego jest testem diagnostycznym dla paciorkowców, proces ten można badać również u drożdży. Barwnik ten w wysokich rozcicńczeniach, a więc stężeniach nietoksycznych, może w nieobecności tlenu pełnić rolę „sztucznego” akceptora protonów i elektronów pochodzących od różnych substratów. Podlega on wtedy redukcji do bezbarwnego leuko-związku. Przenoszenie protonów i elektronów warunkują dehydrogenazy obecne u drobnoustrojów.
. bakterie
Substrat + błękit metylenowy > Substrat utleniony +
+ błękit zredukowany (leukobłękit)
Próbę przeprowadza się w 24-godzinnych bulionowych hodowlach bakterii (z dodatkiem mleka - tło), wprowadzając 1% roztwór błękitu metylenowego. Po półgodzinnej inkubacji hodowli z barwnikiem w temperaturze 37CC ocenia się odbarwienie pożywki. W przypadku silnie dodatniej reakcji obserwuje się całkowite odbarwienie, wynik słabo dodatni (częściowa redukcja) objawia się zabarwieniem przejściowym nicbieskozielonym, wynik ujemny
- brak odbarwienia.
15.5. Inne właściwości biochemiczne drobnoustrojów
Wśród testów często stosowanych w diagnostyce mikrobiologicznej i prezentowanych na ćwiczeniach z mikrobiologii ogólnej, a nic mieszczących się w przedstawionym wyżej układzie, są: wzrost na podłożu Simmonsa z cytrynianem, wykrywanie lecytynazy i fosfatazy oraz zmiany na podłożu
- mleko z lakmusem.
15.5.1. Wzrost bakterii na podłożu Simmonsa z cytrynianem
Na podłożu Simmonsa wyrastają bakterie mające zdolność do wykorzystywania cytrynianu sodowego jako jedynego źródła węgla oraz jako źródła azotu - jonu amonowego. Źródłem tego jonu w podłożu jest diwodorofosforan amonowy. Drobnoustroje rosnąc na tym podłożu w ciągu 48 godzin alkalizują jc, dzięki uwolnieni u amoniaku z. fosforanu amonowego. Pod wyż szcnic pil środowiska prowadzi, w obecności wskaźnika błękitu bromo-lymolowcgo - do zmiany barwy podłoża z zielonej na niebieską (wynik dodatni).
15.5.2. Wykrywanie lecytynazy
Lccytynazy są enzymami o różnym mechanizmie działania, hydrolizują-cymi lecytyny, tj. gliccrofosfolipidy, w których kwas fosforowy jest zc-stryfikowany aminoalkoholcm choliną (trójmctyloctanolamina). Lecytyny występują m.in. w żółtkach jaj kurzych. Obecność lccytynaz u bakterii (cecha charakterystyczna dla wielu laseczek tlenowych i beztlenowych) sprawdzamy przez ich posiew na płytkę agarową zawierającą żółtka jaj. /a wynik dodatni przyjmuje się zmętnienie podłoża wokół wyrosłych kolonii.
15.5.3. Wykrywanie fosfatazy
Fosfataza odszczepia reszty fosforanowe od węglowodanów, tłuszczów lub białek. Jest to więc enzym o szerokiej swoistości substratowej. Wykrywamy go w hodowlach bakterii na podłożu płynnym lub stałym, zawierającym sól sodową difosforanu fenoloftalciny, z której enzym odrywa resztę fosforanową uwalniając barwnik. W przypadku próby dodatniej, po dodaniu do hodowli kropli NaOH lub stężonego NH3, pojawia się różowe zabarwienie.
15.5.4. Zmiany w mleku z lakmusem
Obscrw-acjc wzrostu drobnoustrojów beztlenowych na podłożu, zawierającym mleko z lakmusem lub purpurą bromokrczolową dostarczają uzupełniających danych przydatnych w diagnostyce. Podłoże pokryte warstwą płynnej parafiny zaszczepia się bakteriami i inkubujc przez 48 godzin, prowadząc obserwacje w jej trakcie. Żółte zabarwienie pożywki świadczy o jej zakwaszeniu, barwa niebieska powstaje w w^yniku alkalizacji podłoża. W trakcie wzrostu możemy także obserwować koagulację (ścięcie) mleka spowodowaną wytrąceniem kazeiny przez wytworzony przez bakterie kwas lub pcptonizację (upłynnienie) kazeiny objawiającą się przejaśnieniem hodowli oraz gazowanie. Możemy również obserwować „ścięcie, podpuszczkowe” oraz pcptonizację.
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
Skanowanie map Skaner - urządzenia do zamiany mapy( zdjęcia) z postaci analogowej( fotograficznej) n
DSC01647 * Zaburzenia zdolności do nawiązywania intymności przybierają postać (utrzymywania ludzi na
DSC08189 SEPARATORY MEMBRANOWE Zastosowanie Do pomiarów ciśnienia mediów w postaci cieczy, par i gaz
DSC08210 SEPARATORY MEMBRANOWE Zastosowanie Do pomiarów ciśnienia mediów w postaci cieczy, par i gaz
Slajd5 Zadanie 4. Marysia ma do dyspozycji 10 zł. Może je wydać na czekoladę (*) lub mandarynki (y).
tresc zadania Zadanie - Sposoby adaptacji człowieka do skrajnych warunków klimatycznych Ludzie osied
Re exposure of DSC03360 Matkę Ziemię, przedstawiana w postaci dojrzałej kobiety na koniu lub w towar
26 (12) 26 Do stalowego płaszcza bębna walca przymocowane są na stałe lub zdejmowane stalowe kołki o
img177 ścieków. Z bakterii najczęściej spotyka się Micrococcus, które na pożywkach hodowlanych rosną
Image313 do 9, dlatego celem uzyskania właściwej postaci sumy jest wymagane zastosowanie układu wytw
Zdjęcie0839 Stała dysogacji Do reakcji dysocjacjl można zastosować prawo równowagi chemicznej i napi
więcej podobnych podstron