cwiczenie@003
Metody bezpośrednie
AKADEMIA D i. ;Si I C Z A
* -kolei itr 3
vv-t Metoda biuretowar ^v*tv
i r, ci -f-OLOi • .
Katedra TowarozRa‘.v-*v.
Metoda biuretowa polega na oznaczaniu białek ^peptydow'zawierających co najmniej dwa wiązania peptydowe, które tworzą w środowisku alkalicznym barwne kompleksy z jonami miedzi. Intensywność powstałego fiołkowego zabarwienia jest proporcjonalna do stężenia białka. Przez pomiar wartości absorpcji powstałego zabarwienia roztworu przy długości fali 540 nm oznacza się zawartość białka w roztworze. Metoda ta pozwala na oznaczenie zawartości białka w próbie zawierającej do 4% białka.
Odczynniki. 1. Odczynnik biuretowy: w kolbie miarowej o poj. I dmJ rozpuścić w ok. 500 cm3 wody destylowanej 1,5 g siarczanu (VI) miedzi (II) CuS04'5H20, 6,9 g winianu sodu i potasu NaKC4M406 4H20, dodawać wolno 300 cm3 10-proccntowcgo roztworu wodorotlenku sodu i 2 g jodku potasu i uzupełnić do kreski wodą destylowaną: przechowywać w butelce z ciemnego szkła. 2. Wzorcowy 1-procentowy roztwór białka: w kolbie miarowej o poj. 100 cm3 rozpuścić w 50 cm3 0,9-procentowcgo roztworu chlorku sodu 1 g preparatu albuminy wołowej i uzupełnić do kreski 0,9-proccntowym roztworem chlorku sodu. ;
* Wykonanie oznaczenia. Sporządzenie krzywej standardowej. Do pięciu probówek pobrać kolejno: 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 i 1 cm3 roztworu wzorcowego. Pierwsze cztery probówki uzupełnić do objętości I cm3 0,9-procentowym roztworem chlorku sodu, a następnie do każdej probówki dodać po 4 cm3 odczynnika biuretowego, dokładnie wymieszać i pozostawić w temperaturze pokojowej na 30 min. Zmierzyć wartość absorpcji prób przy długości fali X = 540 nm. Próbą odniesienia jest próba przygotowana w identyczny sposób, lecz zawierająca zamiast białka 0,9-proccntowy. roztwór chlorku sodu.
Wykreślić krzywą standardową (wzorcową), odkładając na osi rzędnych wartość absorpcji, a na osi odciętych — zawartość białka w g na 100 cm3.
Oznaczenie w badanej próbce. Odmierzyć pipetą do probówki 1 cm3 badanego roztworu białka (jeśli próbka zawiera stężenie białka wyższe niż 1%, należy próbkę rozcieńczyć), dodać 4 cm3 odczynnika biuretowego i postępować dalej tak jak przy próbkach wzorcowych. Zawartość białka odczytać z krzywej standardowej (wzorcowej).
-0 -
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
Protokół z ćwiczeń laboratoryjnych - Metody analizy żywności (rok akademicki 2020/2021) Imię i
SNC00739 METODY BEZPOŚREDNIE ZAGĘSZCZAJĄCE HODOWLANE r»/ma/ w Nad rozmazy podbarwione (w u kaio,
entomologia cz 1 (16) METODY BEZPOŚREDNIEGO
Ćwiczenie 11 Metody określania liczby bakterii Zagadnienia teoretyczne Metody określające liczbę
Ćwiczenie 5 Temat: Metodyka nauczania bloku pojedynczego. Wykorzystanie poznanych czynności (element
Nr: 20 Metody obliczeniowe - Budownictwo semestr 2 - wykład nr 1 Metody bezpośrednie - wykorzystanie
image03 Metody bezpośrednieMetoda płytkowa - posiew powierzchniowy 1 ml 1
image04 Metody bezpośrednieMetoda płytek lanych (metoda wgłębna) W metodzie płytek lanych płynne ino
image06 Metody bezpośrednieMetoda filtracyjna 10Oml badanej wody jest filtrowane przez filtr o średn
img001 Przykłady ćwiczeń wg metody Pilatesa (obowiązują w/w/ zasady): 1. Mobilizac
img002 (2) tych samych drobnoustrojów w określonym produkcie posługiwać sie zawsze la sama metoda.ME
cwiczenia .. kj j Beton iwinsKi 11. SI 2000. -,• betonu. P
Cwiczenia rl , PoZumaĄC <o P()<ma6*t7^ <>) Śi/PajlS&J ff. <*Ul
więcej podobnych podstron