3893820015

Podane objętości otrzymanych roztworów podstawowych należy rozcieńczyć w kolbach miarowych 25 ml, dopełniając do kreski wodą destylowaną.

Nanoszenie chromatogramów.

Studenci nanoszą roztwory dla poszczególnych aminokwasów na osobnych płytkach. Linię startową wykreślają ołówkiem 20 mm od dolnej krawędzi, 1-szą plamkę nanoszą w odległości 15 mm od brzegu płytki. Następne plamki nanoszą w równych odstępach, co 15 mm, każdorazowo odmierzając strzykawką Hamiltona po 1 pi roztworów wzorcowych. Jako ostatnią plamkę nanoszą roztwór z zadaniem - mieszaniną aminokwasów.

Uwaga - należy nanosić podaną objętość roztworów ostrożnie, w miarę możliwości porcjami, uprzednio przepłukując strzykawkę nanoszonym roztworem. Przed nanoszeniem roztworu następnego aminokwasu strzykawkę przepłukać najpierw wodą destylowaną. Chromatogram rozwijać techniką wstępującą w układzie n-propanol - woda - chloroform 5:2:1 do wysokości ok. 10 cm powyżej linii startowej.

Płytki wyjąć z komory, zaznaczyć ołówkiem linię czołową, wysuszyć na powietrzu. Poszczególne płytki spryskać roztworem ninhydryny za pomocą urządzenia ChromaJet (obsługuje prowadzący ćwiczenie), w razie potrzeby podgrzać lekko suszarką do włosów. Płytki kolejno umieszczać w densytometrze (obsługuje prowadzący ćwiczenie) - dla każdej postępując wg następującego programu:

1.    Dobranie analitycznej długości fali (skanowanie 1-szego toru chromatogramu za pomocą opcji „multi- wavelength scan”)

2.    Dla wybranej długości fali wykonać skanowanie za pomocą opcji „chromatogram”, deklarując jako zmienną zależną pole powierzchni piku.

3.    Wyświetlić na ekranie otrzymany wykres pola powierzchni piku w funkcji ilości naniesionego aminokwasu (funkcja + współczynnik regresji), odczytać ilość substancji w zadaniu.

4.    Porównać otrzymane wyniki (otrzymane ilości badanych aminokwasów w zadaniu) z

Ocenić przydatność zastosowanej metody do oznaczania poszczególnych aminokwasów.

Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
IMG#19 -14- Roztwór podstawowy- O.lóg azotanu ołowiu(ll) rozpuścić w 10 ml wody . 3 ml 25#/» kwasu a
g/1 sporządziliśmy w kolbie miarowej na 100 ml roztwór wzorcowy azotanów(V) o stężeniu jonów NOj c
DSC09487 Katedra Biochemii» TotayhotogM Oznaczanie Ni w margarynie Odczynniki: 1. Roztwór podstawowy
Podstawy chemii, ćwiczenia laboratoryjne1 zostałych po 5 cm! roztworu wodorotlenku sodu o stężeniu
Podstawy chemii, ćwiczenia laboratoryjne7 Przygotowanie i mianowanie roztworu kwasu solnego o stęże
P1050827 o pojemności 50 ml; 1, 2. 3. 4 i 5 ml roztworu wzorcowego CuSO* o stężeniu 1,5 • lO"3
Picture9 (3) 12 Celem wyznaczenia gęstości roztworu pc o dowolnym stężeniu C należy dokonać liniowe
skanowanie0040 6.2.2. Mianowanie kwasu solnego /«» pomocą roztworu węglanu sodu o stężeniu 0,0500 mo
Picture
9 32 -    stężenia roztworu - ze wzrostem stężenia maleje stopień dysocjacji,
IMG2 053 (2) 3. Układy równowagi faz stopowych Zależność energii swobodnej Gibbsa roztworu stałego
skanowanie0002 7 1.1.2. Oprócz tych podstawowych ml icjestracyjnych. komunikatywnych i edukacyjno ję
skanuj0061 2 na 5. Równowiigl jonowe w rozcieńczonych roztworach wodnych Ml* <V Bocływ

więcej podobnych podstron