1464647302
10
Tomasz Kupiec
nia podstawowych metod kryminalistycznych, a w konsekwencji sprawia, że jedyną skuteczną metodą identyfikacji zwłok pozostaje porównawcza analiza DNA. Wysoka skuteczność technik genetycznych wynika przede wszystkim z ich wysokiej czułości, która umożliwia analizę szczątków o znacznym stopniu rozkładu biologicznego, a także tych, które podlegały działaniu skrajnie niekorzystnych czynników fizycznych i chemicznych. Co więcej, współczesna genetyka sądowa dysponuje różnorodnymi markerami genetycznymi, w tym polimorficznymi sekwencjami zlokalizowanymi w dziedziczonym w linii matczynej mitochondrialnym DNA oraz w linii ojcowskiej chromosomie Y. Dzięki ich zastosowaniu, nawet przy braku najbliższej rodziny możliwe jest przeprowadzenie analizy porównawczej w oparciu
0 materiał pochodzący od dalekich krewnych, również tych żyjących w znacznym odstępie czasowym od osoby identyfikowanej.
Stan zachowania domniemanych zwłok generała Sikorskiego, będących przedmiotem niniejszych badań, uniemożliwił ich identyfikację przez rodzinę i świadków. Brak zachowanych kart daktyloskopijnych, kart dentystycznych
1 innych danych medycznych dotyczących generała Władysława Sikorskiego uniemożliwił ich wykorzystanie w procesie identyfikacji, który w tej sytuacji mógł polegać jedynie na analizie DNA. W czasie sekcji zwłok do badań genetycznych zabezpieczono fragmenty tkanek kostnych, które stanowią najlepszy rodzaj materiału badawczego. W charakterze materiału porównawczego wykorzystano próbkę DNA pochodzącą od wnuczki siostry generała. Podjęto również próbę pozyskania materiału genetycznego pochodzącego bezpośrednio od generała. W tym celu zabezpieczono ślady materiału biologicznego z należącej do niego odzieży i przedmiotów osobistego użytku przekazanych przez najbliższą rodzinę oraz udostępnionych przez Muzeum Wojska Polskiego w Warszawie. Zgodnie z przedstawionym przez Instytut Pamięci Narodowej postanowieniem pobrano i poddano analizie genetycznej ślady biologiczne z elementów odzieży znalezionej przy zwłokach będących przedmiotem ekshumacji.
MATERIAŁY I METODY
Materiał dowodowy
W czasie sądowo-lekarskich oględzin i sekcji zwłok, do badań identyfikacyjnych pobrano fragment kości udowej (K1) oraz ząb-kieł (Z1). Badaniom biologicznym, zgodnie z treścią postanowienia, poddano także zabezpieczone fragmenty odzieży znalezione na zwłokach w postaci: chusteczki materiałowej, podkoszulka, ocieplacza na biodra, spodenek, fragmentu obszycia podkoszulka, koszuli, fragmentu taśm materiałowych oplatających stopy, kolana i kciuk, fragmentu dwóch kocy barwy khaki, oraz poduszki. W trakcie przeprowadzonych oględzin ujawniono na koszuli oraz spodenkach obecność włosów ludzkich, z których pięć pobrano do badań genetycznych (W1-W5).
Materiał porównawczy
Jako materiał porównawczy pobrano wymaz ze śluzówki jamy ustnej krewnej w linii matczynej generała Władysława Sikorskiego, pani Ewy Wojtasik (P1). Przedmiotem badań był również materiał biologiczny obecny na przedmiotach osobistego użytku generała Władysława Sikorskiego i zabezpieczony z nich za pomocą taśm do zbierania mikrośladów oraz jałowych pałeczek wymazowych. Badaniom poddano: 8 śladów (S1-S8) pobranych z pantofli i szczotki do munduru przekazanych przez krewną Generała, a także 27 śladów biologicznych (S9-S35) pobranych z elementów umundurowania i przedmiotów udostępnionych przez Muzeum Wojska Polskiego w Warszawie.
Próbki materiału kostnego (K1, Z1) poddano procesowi oczyszczania - myto pod bieżącą wodą, w 15% podchlorynie sodu, a następnie w 70% etanolu. Dodatkowo zostały one poddane działaniu promieniowania UV. Tak przygotowany materiał, po wysuszeniu, poddano kruszeniu w ciekłym azocie z zastosowaniem aparatu FreezerMill 6750 (Spex CertiPrep, Matuchen, USA). Około 3 g proszku kostnego inkubowano w temperaturze 56°C przez noc w obecności 3 ml buforu lizującego (0,5M EDTA, 10% SDS) z dodatkiem 225 /jI proteinazy K (10 mg/ml) oraz 120 n\ 1M DTT. Po inkubacji próbki kości poddano dwukrotnej ekstrakcji zbuforowaną mieszaniną fenolu, chloroformu i alkoholu izoamylowego (Sigma Chemical, Steinhaim, Niemcy), a następnie zagęszczano na kolumienkach typu Amicon Ultra -15 (Millipore, Billerica, USA).
Izolacja materiału genetycznego z zabezpieczonych włosów (W1-W5) poprzedzona została ich wstępnym trawieniem w buforze lizującym z dodatkiem proteinazy K (10 mg/ml), a następnie płukaniem sterylną wodą. Zabiegi te prowadzono w celu pozbycia się ewentualnych cząsteczek obcego DNA z powierzchni włosów.
Ślady biologiczne (S1-S35), materiał porównawczy (P1) oraz włosy (W1-W5) poddano
Wyszukiwarka
Podobne podstrony:
PODSTAWCm l WIADOMOŚĆ * AKTYWNYMSŁUCHAMI Co sprawia, że jedni S4 dobrymi słuchaczami, okazują
kscan62 III częśćMetodyelektroanalityczne 9. Podstawy metod elektroanalitycznych 10.
P2/AIRPT/6. Elementy systemów SCADA - 5h W,10 L, 4 ECTS Cel: Poznanie podstawowych zagadnień oraz me
434 (10) 434 Podstawy nawigacji morskiej • wyznaczenie podstawowych metod określan
10 Tomasz Pietrzak Prezentacja online, czyli webinar od podstaw informacja musi zawierać jaką korzyś
m01 2 Przegląd podstawowych metod badawczych 2.1 Klasyfikacja metod badawczych 2.2
więcej podobnych podstron